魚類革蘭氏陽性鏈狀球菌感染症之研究
Studies on Gram-positive Streptococcus-like Bacteria Infections in Fish
研究生: 吳宗炳 Wu, Z.B.
指導教授: 蔡信雄 Tsai, S.S.
[摘要]
魚類革蘭氏陽性鏈狀球菌感染症(Gram-positive Streptococcus-like bacteria infections)在台灣地區於高水溫的季節，常造成養殖魚業嚴重的經濟損失。罹病魚隻之症狀多以體表出血為主徵，組織病變亦皆以菌血症為主。至目前為止，其感染菌種尚不明確。在本研究共蒐集86株野外分離株，參照16S rRNA核酸序列自行設計引子對進行PCR偵測及核酸定序，作為菌種鑑定之依據，再佐以API 20 STREP及API 50 CHL鑑定系統與耐鹽性試驗行二次確認。結果顯示對魚類具致病性的革蘭氏陽性鏈狀球菌計有四種，依序為Streptococcus agalactiae (44株)，Streptococcus iniae (23株)，Streptococcus difficile (16株)及Lactococcus garvieae (3株)。Streptococcus agalactiae及Streptococcus difficile大多感染淡水養殖魚種，Streptococcus iniae則以鹹水養殖魚種為主，而Lactococcus garvieae目前只在烏魚發現。為了縮短日後魚類革蘭氏陽性鏈狀球菌菌種之鑑定時間，進而針對Streptococcus agalactiae及Streptococcus iniae設計具菌種特異性之引子對。在特異性評估試驗上，利用24株對照株與Streptococcus agalactiae及Streptococcus iniae野外分離株進行單管多引子PCR檢測，結果只能由目標菌種增幅出PCR產物。經定序結果顯示此特異性引子確實可用在Streptococcus agalactiae及Streptococcus iniae的區別診斷，惟無法區分Streptococcus agalactiae與Streptococcus difficile。本實驗所蒐集之44株Streptococcus agalactiae及16株Streptococcus difficile，無論在16S rRNA序列上亦或生化特性上皆具有極高度的相似性，然而Streptococcus difficile菌落具有極黏著之特性，且呈現g溶血之反應，與44株具b溶血且缺乏黏性的Streptococcus agalactiae有所不同。抗菌劑敏感性試驗之結果顯示Cephalexin、Florfenicol、Chloramphenicol及Doxycycline 對革蘭氏陽性鏈狀球菌均具有極佳的感受性，可供藥物選擇之參考。
關鍵字: 鏈球菌
【Abstract】