二,病原学特征
HIV属于逆转录病毒科慢病毒属中的人类慢病毒组,为直径约100~120nm球形颗粒,由核心和包膜两部分组成.核心包括两条单股RNA链,核心结构蛋白和病毒复制所必须的酶类,含有逆转录酶(RT,P51/P66),整合酶(INT,P32)和蛋白酶(PI,P10).核心外面为病毒衣壳蛋白(P24,P17).病毒的最外层为包膜,其中嵌有gp120(外膜糖蛋白)和gp41(跨膜糖蛋白)两种糖蛋白.
HIV基因全长约9.8kb,含有gag,pol,env 3个结构基因,2个调节基因(tat反式激活因子,rev毒粒蛋白表达调节子)和4个辅助基因(nef 负调控因子,vpr 病毒r蛋白,vpu 病毒u蛋白和vif 毒粒感染性因子).
HIV是一种变异性很强的病毒,各基因的变异程度不同,env基因变异率最高.HIV发生变异的主要原因包括逆转录酶无校正功能导致的随机变异;宿主的免疫选择压力;不同病毒DNA之ARV,病毒DNA与宿主DNA之间的基因重组;以及药物选择压力,其中不规范的抗病毒治疗是导致耐药性的重要原因.
根据HIV基因差异,分为HIV-1型和HIV-2型,两型间氨基酸序列的同源性为40-60%.目前全球流行的主要是HIV-1(本方案中如无特别说明,HIV即指HIV-1).HIV-1可进一步分为不同的亚型,包括M亚型组(主要亚型组),O亚型组和N亚型组,其中M组有A,B,C,D,E,F,G,H,I,J,K 11个亚型.此外,近年来发现多个流行重组型.HIV-2的生物学特性与HIV-1相似,但其传染性较低,引起的艾滋病临床进展较慢,症状较轻.HIV-2型至少有A,B,C,D,E,F,G 7个亚型.
我国以HIV-1为主要流行株,已发现的有A,B(欧美B),B'(泰国B),C,D,E,F和G 8个亚型,还有不同流行重组型.1999年起在部分地区发现并证实我国有少数HIV-2型感染者.及时发现并鉴定HIV各种亚型对于追踪流行趋势,及时做出诊断,开发新的诊断试剂和新药研制,疫苗开发均具有重要意义.
HIV需借助于易感细胞表面的受体进入细胞,包括第一受体(CD4,主要受体)和第二受体(CCR5和CXCR4等辅助受体).根据HIV对辅助受体利用的特性将HIV分为X4和R5毒株.R5型病毒通常只利用CCR5受体,而X4型病毒常常同时利用CXCR4,CCR5和CCR3受体,有时还利用CCR2b受体.
HIV在外界环境中的生存能力较弱,对物理因素和化学因素的抵抗力较低.因此,对HBV有效的消毒和灭活方法均适用于HIV.除此之外,75%的酒精也可灭活HIV,但紫外线或γ射线不能灭活HIV.
HIV对热很敏感,对低温耐受性强于高温.56℃处理30分钟可使HIV在体外对人的T淋巴细胞失去感染性,但不能完全灭活血清中的HIV;100℃20分钟可将HIV完全灭活.
三,实验室检测
HIV/AIDS的实验室检测方法包括HIV抗体,病毒载量,CD4+ T淋巴细胞,P24抗原检测等.HIV1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准,病毒载量测定和CD4+ T淋巴细胞计数是判断疾病进展,临床用药,疗效和预后的两项重要指标.小于18月龄的婴儿HIV感染诊断可以采用核酸检测方法,以2次核酸检测阳性结果作为诊断的参考依据,18月龄以后再经抗体检测确认.
(一)HIV1/2抗体检测:包括筛查试验(含初筛和复测)和确认试验.
HIV1/2抗体筛查检测方法包括酶联免疫试验(ELISA),快速检测(快速试纸条和明胶颗粒凝集试验)等.ELISA是常用的抗体筛查方法,但随着自愿咨询检测(VCT)工作的开展,也可采用快速检测.HIV抗体确认试验常用的方法是免疫印迹法(WB).
筛查试验呈阴性反应可出具HIV1/2抗体阴性报告.筛查试验呈阳性反应,不能出具阳性报告,只可出具"HIV抗体待复查"报告.经确认试验HIV-1(或HIV-2)抗体阳性者,出具HIV-1(或HIV-2)抗体阳性确认报告,并按规定做好咨询,保密和报告工作.
(二)病毒载量测定
病毒载量一般用血浆中每毫升HIV RNA的拷贝数(c/ml)来表示.
病毒载量测定常用方法有逆转录PCR系统(RT-PCR),核酸序列依赖性扩增(NASBA NucliSens )技术,分枝DNA信号放大系统(bDNA).不同病毒载量试验方法的比较见表1.
表1 不同病毒载量试验方法的比较
技术
原理
RT-PCR
bDNA
NASBA
动态
范围

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