培养12-16h的枯草杆菌(Bacillus subtilis),培养24小时的大肠杆菌(Escherichia coli)
结晶紫、卢哥氏碘液、95%酒精、蕃红、液体石蜡、擦镜液
载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。
实验步骤
一、单菌的革兰氏染色:
分别取枯草杆菌、大肠杆菌进行革兰氏染色。
1.制片:
(1) 涂菌:取干净载玻片一块,在载玻片上加一滴生理盐水,按无菌操作法取菌涂片,注意取菌不要太多。
(2) 干燥:让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。
(3)固定:手执玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)
2.染色
(1) 初染:滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1~2min,水洗。
(2) 媒染:用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1min,水洗。
(3) 脱色:用滤纸吸去玻片上的残水,将玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。