05级植物生理生化实验考试试卷（B）及答案

一、试剂配制题。要求计算出溶质及溶剂的数量并写清配制过程。

1．将100%的丙酮稀释成80%的丙酮100ml，应如何配制（20分）？

答：根据公式：C1V1=C2V2

设需要100%的丙酮X毫升得：100%×X=80%×100 得X=80毫升

配制过程：用量筒准确量取80毫升100%的丙酮，倒入100毫升的容量瓶中，加水定容到100毫升。

2．配制0.1mol·L-1的草酸溶液250ml应如何配制（草酸分子量90）？（20分）

答：设需要称取草酸X克。_

根据：M=X/40/0.25 得：0.1=X/40/0.25_ X=1克

配制过程：用电子天平称取1克草酸，放入小烧杯中，用少量水溶解，倒入250毫升的容量瓶中，多次用蒸馏水清洗烧杯，一并倒入容量瓶中，最后用蒸馏水定容到250毫升，即为0.1mol·L-1的草酸溶液250ml。

二、用BTB变色法测定种子生活力所依据的原理是什么?为什么一定要将溶胶调至蓝-蓝绿色? （20分）

___ 答：原理：活细胞在呼吸过程中释放的CO2溶于水变成H2CO3，后者解离成H＋与HCO3-，使得活组织周围介质的酸度增加。BTB（溴麝香草酚蓝）是酸碱指示剂，变色范围为pH 6.0～7.6，其颜色随pH改变而改变，pH＜7.1时呈黄色，pH＞7.1时呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH 7.1）。因此用BTB检测酸度的变化，可鉴定种子的生活力。

___ 因为BTB（溴麝香草酚蓝）的变色点为pH 7.1此时为蓝-蓝绿色，如果pH过大而种子较弱则无法测出呼吸强度，所以一定要将溶胶调至蓝-蓝绿色。

三、在用小液流法测定组织水势时，如果在选定的系列浓度中小液滴全部上升说明什么问题？为什么?此时如何调整实验才能取得所需数据？（20分）

___ 答：全部上升说明所配的蔗糖溶液浓度太大了。

因为所配的蔗糖溶液的浓度从小到大，水势逐渐降低。组织的水势大于蔗糖溶液最大的水势（浓度最小的），组织失水，液滴比重变小，所以系列浓度中小液滴全部上升。此时应该把所配的系列蔗糖溶液的浓度变小些才能取得所需数据。

四、用NBT光化还原法测定SOD活性时,反应液颜色的深浅与酶的活性高低是什么关系?为什么？（20分）

___ 答：反应液颜色的深浅与酶的活性高低呈负相关。氮蓝四唑的水溶液为淡黄色。照光时，反应体系产生氧自由基，可将NBT还原为蓝色的甲月簪，该产物在560nm处有一最大吸收峰。当有SOD存在时， 它可以清除氧自由基而抑制此反应。SOD活性越强，抑制作用越明显，反应液的颜色越浅，根据抑制的程度可以测量SOD的活性。

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