第 &0 卷 *$$B 年 " 月
! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !
分析化学( QC,RS .TIRTC) 研究简报 ! KD(2;9; U8562-7 8V I2-7F:(<-7 KD;4(9:6F
! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !
第" 期 000 / 00%
牛血清白蛋白在超薄纳米二氧化钛膜表面的印迹与吸附
谢亚林! 司士辉 # ! 杨政鹏! 李 赛! 彭 芳
( 中南大学化学化工学院, 长沙 "#$$%&) 摘! 要! 基于溶胶凝胶分子印迹方法, 以溶胶二氧化钛 '()* 为基质印迹了牛血清白蛋白分子.用 #+ 的 ,-). 溶液可有效地除去纳米 '()* 印迹膜中的模板分子.采用石英晶体微天平现场技术, 研究了牛血清白蛋 白在超薄纳米 '()* 膜表面的吸附行为.研究表明, 牛血清白蛋白在印迹膜和非印迹膜上的吸附量都随溶液 浓度增加而增大, 印迹膜具有吸附的特异性和可再生性, 其吸附量是非印迹膜的 & / 0 倍; 在非印迹膜上的吸 附符合 1-2345(6 吸附模型, 而在印迹膜上的吸附符合 -7789:;6(] 洗脱等因素, 难以采用该方法对其进行分子印迹 .文献 [B] 报道了一种溶胶凝胶分子印迹技术, 它是
利用溶胶凝胶过程把模板分子引入到无机物网络结构中, 形成一种刚性材料, 可以克服有机聚合物的刚 性和惰性差的缺点, 成为分子印迹一个重要的研究方向.溶胶凝胶技术可制备超薄纳米膜, 使得识别位
[%] 点处在颗粒的表面, 提高了模板分子和膜之间的结合效率 .采用溶胶凝胶分子印迹技术, 等在 1;;
实验表明无机纳米材料是一种很好的分子印迹材料, 具有比表面积大和良好 '()* 表面印迹了几种羧酸,
[@, 的机械稳定性和热稳定性等优点 #$].
研究 本实验利用该技术在石英晶体微天平表面制备了牛血清白蛋白分子印迹的超薄纳米 '()* 膜, 了牛血清白蛋白在印迹膜与非印迹膜表面的吸附行为及影响因素.
#" 实验部分
#A !" 试剂与仪器 牛血清白蛋白 GHI, ( 美国 H(34- 公司) 锐钛矿型纳米 '()* 溶胶 ; (粒径 0 24, 广州门德纳米科技有限 公司) 其余试剂均为分析纯, ; 实验用水为高纯水, $A $# 487 J 1 的 ,-). 和稀释了的 .K7 调节 =. 值. 用 石英晶体微天平 LKM, ( 自制) N68:;O K&#$$ 可编程通用计数器 韩国兴仓 N68:;O) ; ( . #$ #" 纳米 %&'# 膜的制备 石英晶体两侧各有一 ! 0 44 的银电极, $A # 487 J 1 的 ,-). 溶液处理 *$ 4(2, 用 用水清洗数次. 在 #$$ !1 $A 0+ 纳米 '()* 溶胶中加入 #$ !1 0$$ 43 J 1 的模板分子牛血清白蛋白, 搅拌均匀后在冰箱中 ("P ) 存放 #* D, 用旋转涂膜法制备纳米 '()* 印迹膜, 再将印迹膜加热韧化, 使作用位点发生重排以利 于印迹分子的结合.用 #+ 的 ,-). 溶液浸泡除去纳米 '()* 印迹膜中的模板分子.同样用没有添加模 板分子的纳米 '()* 溶胶制备纳米 '()* 非印迹膜.制得的纳米 '()* 膜在 &$$P 下烘烤 # D 以增加膜的稳 定性.
! *$$> $@ #@ 收稿; *$$> #* $% 接受 本文系国家自然科学基金资助项目 ,8A *$"B0$>0) ( # C 4-(7:9(9D(D5(E F-D88A E 卷
!" #$ 石英晶体微天平 %&') ( 测定 ()* 在 +,-! 膜上的吸附量 用硅橡胶将石英晶体的一面封好使之只与空气接触, 涂有膜的一面与待测液接触.用导线将电极 连接在 !"#$$% 振荡器上, 检测器和振荡器放在金属盒中以避免周围电磁噪声.检测前, 将制得的 $&'( 膜用 )* 光照射 (+ ,&- 后, 再用水洗涤数次以除去表面吸附的杂质.室温下将 +. +/ ,01 2 % 的磷酸缓冲 溶液加入到检测池中, 待频率稳定后于检测池中注入一定体积的 345 溶液 溶于相同的 67 的磷酸缓冲 ( 溶液) .可编程通用计数器 890:;/++ 监测频率, 录 的 数 据 存 于 计 算 机 中.基 于 4 @;9A9;B 方 记
[//] 程 , 根据吸附前后 C"D 的频率变化值计算 345 在 $&'( 膜上的吸附量.
#$ 结果与讨论
#. .$ ()* 溶液在不同 +,-! 膜上的吸附 图 / 为 /E++ ,F 2 % 的 345 溶液 67 G H. /) 5F 电极, ( 非印迹和印迹膜表面的吸附行为.从 ( 在 $&' 图 / 可以看出, 345 在 5F 电极, ( 非印迹和印迹膜表面 $&' 吸附导致 C"D 频率下降, 分别为 >H, 和 EN+ 7O; //+ 吸附平 衡时间分别为 N, 和 ( ,&-. E 345 单肽链 >N 位含有一个巯基, 其余为二硫键, 其氨

下一页