国立清华大学
硕士论文
细胞内锌离子对鼠大脑皮质神经元 麸胺酸受器之调控
所别 生命科学研究所 组别 生物医学组 学号姓名 874259 孙志彰 指导教授 张兖君 教授
中 华 民 国 八 十 九 年 七 月
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授权书
(博硕士论文) 本授权书所授权之论文为本人在___国立清华__大学(学院)_生命科学_系所 _生物医学_组_八十八_学年度第_二_学期取得_硕_士学位之论文. 论文名称:__细胞内锌离子对鼠大脑皮质神经元麸胺酸受器之调控_____ □同意 □不同意 本人具有著作财产权之论文全文资料,授予行政院国家科学委员会科学技 术资料中心,国家图书馆及本人毕业学校图书馆,得不限地域,时间与次 数以微缩,光碟或数位化等各种方式重制后散布发行或上载网路. 本论文为本人向经济部智慧财产局申请专利的附件之一,请将全文资料延 后两年后再公开.(请注明文号: )
□同意
□不同意 本人具有著作财产权之论文全文资料,授予教育部指定送缴之图书馆及本 人毕业学校图书馆,为学术研究之目的以各种方法重制,或为上述目的再 授权他人以各种方法重制,不限地域与时间,惟每人以一份为限.
上述授权内容均无须订立让与及授权契约书.依本授权之发行权为非专属性发行 权利.依本授权所为之收录,重制,发行及学术研发利用均为无偿.上述同意与不同意 之栏位若未钩选,本人同意视同授权. 指导教授姓名: 张兖君 研究生签名: (亲笔正楷) 日期:民国 89 年 7 月 20 日 学号:874259 (务必填写)
1. 本授权书请以黑笔撰写并影印装订於书名页之次页. 2. 授权第一项者,请再交论文一本予毕业学校承办人员或迳寄 106-36 台北市和平东路 二段 106 号 1702 室 国科会科学技术资料中心 王淑贞.(本授权书谘询电 话:02-27377746) 3. 本授权书於民国 85 年 4 月 10 日送请内政部著作权委员会(现为经济部智慧财产局) 修正定稿. 本案依据教育部国家图书馆 85.4.19 台(85)图编字第 712 号函办理.
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摘要
神经突触是神经细胞间讯息传递的主要通道.而麸胺酸 (glutamate)为主要兴奋性神经传导物质,功能除讯息传导外,也涉 及学习与记忆.中枢神经系统中,锌为脑部含量第二高(仅次於铁) 的微量元素,与麸胺酸共同存在於前突触端(presynaptic terminal) 的 synaptic vesicle 中 , 於 神 经 兴 奋 时 共 同 释 放 入 突 触 间 隙 (synaptic cleft) . 之 后 , 锌 离 子 藉 由 多 种 通 道 进 入 后 突 触 端 (postsynaptic terminal).本论文主要在探讨细胞内锌离子对麸胺 酸受器的调控. 我们使用二次全细胞电位箝制法,第一次全细胞电位箝制法使用 正常的 internal solution,第二次全细胞电位箝制法使用内含 10 μM 锌离子的 internal solution.在二次箝制实验中,我们以药理 学 方 法 , 研 究 细 胞 内 锌 离 子 对 突 触 间 讯 号 传 递 (synaptic transmission)之影响,我们也测试细胞对外加麸胺酸受器促效剂的 ,最大电流的二 反应,并以 Hill equation 估计出其最大电流(Imax) 分之一时的打药时间(EC50)与 Hill coefficient.比较前后两次箝 制实验,得到以下结果:细胞内锌离子导致 spontanous excitatory postsynaptic current (sEPSCs)中穿透过 NMDA 受器的部分增大 2.61±1.23 倍 sEPSCs 中穿透过 non-NNMDA 受器的部分增大 1.66±0.29 , 倍;并促进神经细胞对外加 NMDA 与 glutamate 所引发向内电流之 Imax 的反应,增大的比值分别为 1.73±0.21 与 4.51±1.18.所以,我们推 论细胞内锌离子可增强麸胺酸受器的活性.
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目
录
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谢志……………………………………………………………………
摘要…………………………………………………………………… ii 壹, 绪论……………………………………………………………… 1-1. 麸胺酸与麸胺酸受器……………………………………… 1-2. 锌离子与麸胺酸受器……………………………………… 贰,材料与方法……………………………………………………… 2-1. 细胞培养…………………………………………………… 2-2. 二次全细胞电位箝制法…………………………………… 2-3. 以二次全细胞电位箝制法研究突触间讯号之传递……… 2-4. 以二次全细胞电位箝制法研究麸胺酸受器……………… 2-5. 电生理讯号的撷取,储存与分析………………………… 2-6. 锌离子之灌流……………………………………………… 2-7. 神经细胞树突的局部给药………………………………… 2-8. 影像之撷取,储存与处理………………………………… 1 1 3 5 5 7 8 8 10 11 11 11

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