上海洪纪仪器设备有限公司
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维生素 K 的测定
此处介绍蔬菜中维生素 K1 的测定方法(HPLC 法)和食物及饲料中水溶性维生素 K3(甲萘醌)
的测定方法
一、蔬菜中维生素 K1 的测定方法-HPLC 法1.原理
蔬菜中的维生素 K1 经有机溶剂提取后,经失活的磷酸盐处理过的氧化铝色谱柱进行净化,再用
液相色谱法将维生素 K1 分离并进行定性定量测定.
2.适用范围
本标准适用于各类蔬菜、绿色植物及其干制品中维生素 K1 的测定.
3. 仪器:
(1) 实验室常用设备
(2) 打碎机
(3) 202-R 型恒温干燥箱
(4) 色谱柱:为0.8cm*30cm 的玻璃柱,底端收缩变细,并装有活塞,活塞上约 1 cm 处有一
玻璃筛板,筛板孔径为 16~30μm,柱上端膨大为容积约 30ml 的储液池.使用前需干燥
(5) 旋转蒸发器
与旋转蒸发器配套的旋转蒸发瓶:具塞,圆底,容积为 150ml.
(6) 恒温水浴锅
(7) 高纯氮气
(8) 高速离心机
与高速离心机配套的小离心管:具塞,容积为 1.5~3.0ml.
(9) 紫外分光光度计
(10) HPLC:高效液相色谱仪,带紫外检测器
4.试剂
除特殊说明实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯,有机溶剂使用前需重新蒸馏.
3.1 无水硫酸钠:使用前需在 150℃的烘箱内烘烤 4~8 小时,以去除水分.
3.2 0.14mol/L Na2SO4 溶液:称取 20g 无水硫酸钠,用蒸馏水溶解后定容至 1L.
3.3 丙酮:分析纯.
3.4 石油醚:沸程 30~60℃,分析纯.
3.5 0.6mol/L 碘化钾溶液:称取 10g 碘化钾,用蒸馏水溶解定容至 100ml.
3.6 5g/L 淀粉液:称取 0.5g 可溶性淀粉,用水溶解定容至 100ml.
3.7 乙醚:分析纯.不含过氧化物.
(1) 过氧化物的检查方法:用5ml 乙醚加 1ml0.6mol/L 碘化钾溶液,振摇 1min,如有过氧化
物则放出游离碘,水层呈黄色.或加 4 滴5g/L 淀粉液,水层呈蓝色.则该乙醚含有过氧化物需
处理后使用.
(2) 去除过氧化物的方法:重蒸时瓶中加一段纯铁丝,弃去 10%初馏液和 10%残留液.
3.8 洗脱液:石油醚+乙醚(97+3).
3.9 甲醇:优级纯.
3.10 正己烷:优级纯.

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