高中生物新课标实验专题复习
考纲要求:理解实验目的,原理,方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用.
实验一:观察DNA,RNA在细胞中的分布(必修一P26)
一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
二.实验原理:
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.利用甲基绿,吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布.
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合.
三.方法步骤:
操作步骤 注意问题 解释
取口腔上皮细胞制片 载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液
用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞
将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果
保持细胞原有形态
消毒为防止感染,漱口避免取材失败
固定装片
水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min 改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色
冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸
染色 滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min
观察 先低倍镜观察,选择染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察 使观察效果最佳
实验二 检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质(必修一P18)
一.实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类,脂肪和蛋白质
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应.
1.可溶性还原糖(如葡萄糖,果糖,麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀.如:
葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色).淀粉遇碘变蓝色.
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应.)
三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果,梨.(因为组织的颜色较浅,易于观察.)
2.做脂肪的鉴定实验.应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子).
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清.
四,实验试剂
斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液),苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液),体积分数为50%的酒精溶液,碘液,蒸馏水.
五,方法步骤:
(一)可溶性糖的鉴定
操 作 方 法 注 意 问 题 解 释
1. 制备组织样液.
(去皮,切块,研磨,过滤) 苹果或梨组织液必须临时制备. 因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖.
2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液.
3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡. 应将组成斐林试剂的甲液,乙液分别配制,储存,使用前才将甲,乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液,乙液分别加入苹果组织样液中进行检测. 斐林试剂很不稳定,甲,乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲,乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu ( OH ) 2生成.

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