②
接种易感动物
把待检材料接种易感动物,待其发病死亡后,取 其血液或组织器官材料,接种到培养基上.利用这 种方法不但可以从污染的材料中分离出病原菌,而 且还可以确定病原菌的致病性和毒力.
③
化学药品处理
有些化学药品对某些微生物有极强的抑制力,而 对另一些微生物则没有抑制作用或很小.因此,可 将适宜的化学药品加入培养基中分离微生物. 如:
培养基中加入一定量的龙胆紫则可抑制许多革兰氏阳性 菌的繁殖,有利于阴性菌的分离培养; 用50%的酒精或0.1%升汞水溶液处理真菌性病料几分钟, 再用灭菌水洗涤,就可杀死部分污染的杂菌.
2. 平板划线分离培养法
① 培养基平板的准备
取普通琼脂培养基或含有特殊成分的琼脂培养基,融化 并让其冷却至50℃左右,倾入灭菌平皿中,每个平皿约 15mL,使其分布均匀,冷却凝固后即为固体平板培养基.
②
各种物品的贮备
取出待检材料,置于工作台上;
接种前准备好酒精灯,接种环,火柴,酒精棉球, 试管架等.
②
各种物品的贮备
如有超净工作台,应先打开通风机,过滤除尘,如 有紫外线灯应同时打开,10-15min后,开始工作. 不论在桌面上还是在超净工作台上接种,都要事先 作好准备工作,把所用的物品器械摆好.
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平板划线
以左手持平板,中指,无名指和小指托着平板底, 拇指和食指打开平皿盖,使盖与底成30度夹角,以便 划线.
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平板划线
右手握接种环,先灭菌铂丝部分,待丝烧红后, 再于火焰上灭菌金属棒部分.
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平板划线
把接种环上的材料涂在培养基的一侧,一般作3-5 次划线.
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平板划线
环上的多余细菌材料烧掉后,从第1次划线引出第 2次划线;
③
平板划线
再从第2次划线引出第3次划线,如此反复3-4次划 线后,即可把整个平板表面划满,注意每一次划线只 能与上一次划线重叠,这样就可在最后的1-2次划线 上出现多量的单个菌落,以便进行纯培养.
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平板划线
3. 厌氧菌的分离培养法
通常使用物理去氧,化学去氧和生物去氧 实验室常用:厌氧培养箱 厌氧肉汤
3. 厌氧菌的分离培养法
厌氧菌培养的温度一般为35-37℃. 初代分离厌氧菌,一般要48h才能长出,生长较缓 慢的厌氧菌需要5-7天.
接种 破伤风杆菌
破伤风杆菌
接种 产气荚膜杆菌

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