大黄中蒽醌类成分的提取分离与鉴定
天然药物化学教研室
实验目的
1.掌握PH梯度萃取的原理及操作技术;
2.掌握蒽醌类化合物鉴定方法;
3.了解液液萃取法分离混合物的实验方法;
实验原理
利用乙醇为提取溶剂,可把不同类型性质互异的蒽醌类成分提取出来;
总蒽醌苷元在乙醚中有一定的溶解度,故回收乙醇后得总提取物可用乙醚提取总苷元;
根据蒽醌衍生物的酸性强弱,用不同的碱液进行萃取,最后得到不同的蒽醌苷元.
实验方法
1,大黄中总蒽醌成分的提取分离
大黄粗粉100g
置1000ml 圆底烧瓶中,加入95%乙醇250ml,回流提取2hr,趁热抽滤
醇液
药渣
加入95%乙醇200ml,回流提取1.5hr,趁热抽滤
醇液
药渣
乙醇提取液
静置冷却,抽滤
滤液
减压回收乙醇至糖浆状,将浓缩物转移至250ml三角瓶中
乙醇总提物
放冷,加入乙醚60ml冷浸,振摇20′将乙醚液倾入500ml三角瓶中
乙醚层
浸膏
40ml乙醚+16ml丙酮冷浸三次(每次15′)
乙醚层
浸膏
乙醚总提液
2,游离蒽醌的分离
乙醚总提液
5%NaHCO3水溶液萃取3次,每次40,30,30ml,至水层颜色变浅
乙醚层
碱水层
5%Na2CO3水溶液萃取3次,每次40,35,35ml
碱水层
乙醚层
2%NaOH水溶液萃取3次,每次30ml,
乙醚层
碱水层
滴加HCl酸化,静置沉淀,抽滤,水洗至中性,干燥
沉淀I,大黄酸
酸化,抽滤水洗,干燥
沉淀Ⅱ
大黄素
酸化,抽滤水洗,干燥
沉淀Ⅲ
大黄素甲醚,大黄酚
3,蒽醌类化合物的检识
(1)薄层鉴别
吸附剂:硅胶
展开剂:石油醚-正己烷-苯-甲酸乙酯-甲醇-水
(25:75:5:35:6:25)
显 色:紫外灯下观察,斑点为黄色
(2)呈色反应
① 滴加2%NaOH水溶液,观察颜色变化
② 滴加0.5%醋酸镁乙醇溶液,观察颜色变化
③ 滴加浓硫酸数滴,观察颜色变化
思考题
PH梯度萃取的原理是什么
大黄中各蒽醌化合物的酸性及极性强弱顺序如何
根据大黄中所含五种羟基蒽醌的结构,说明为什么它们可以分别被不同强度的碱性水溶液提取出来