琼脂糖电泳技术
琼脂糖电泳的用途
- 判断扩增片断的大小
- 回收扩增片断
- 用于转印进行Southern印迹
问题
如何获得清晰的琼脂糖电泳照片呢?琼脂糖电泳结果的影响因素
- 凝胶
- 电泳液
- 电压
- 检测手段
琼脂糖凝胶浓度的选择
- 1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比。
- 2、琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过20kb 。
- 3、不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。 琼脂糖浓度与DNA分离范围
琼脂糖浓度 /% 0.3 0.6 0.7 0.9 1.2 1.5 2.0 线状DNA大小/kb 60-5 20-1 10-0.8 7-0.5 6-0.4 4-0.2 3-0.1
电泳缓冲液