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分析化学
第 34 卷
2. 2
色谱条件
4. ; 30℃ ; 进样量: L; 20 样品运行时 色谱柱选用资生堂 MG-Ⅱ C18 柱(5 m, 6 mm × 250 mm) 柱温: 间: min; 15 VWD 波长选用 485 nm, 作为对位红的检测波长; 流动相为乙腈: 水 / 90: 10 V / V) 不需要缓冲 ( , 盐液作流动相; 仪器为四元泵配置, 采用等梯度流动相洗脱. 2. 3 样品的预处理 辣椒酱, 辣酱油, 选自宁波出入境报检样品 阴性, 冷冻放存, ( 4℃ 备用) .称取 4 g 左右的样品于 50 mL 离心管中, 加入 20 mL 乙腈提取,台式分散仪匀浆 5 min, 并用旋涡混合仪充分混匀, 8000 以 r / min 离心 10 min, 将提取液收集到 15 mL GPC 仪专用分析瓶中. 编辑 GPC 运行方法, 执行 GPC 标准程序 Standard GPC-process) ( 运行, 设定泵流速为 5. 0 mL / min, GPC 系统的流动相为乙酸乙酯: 环己烷 1, / V) 前运行时间, (1: V ; 主运行时间和尾运行时间分别为 1600, 500 和 300 s; 残渣冲洗设定为 3 个循环 cycles) 样品吸入体积为 6400 L; ( ; 选择溶液为无沉淀 Sedi( mentation of sample) 模式下进行凝胶净化操作.净化后的洗脱收集液于旋转蒸发仪蒸发浓缩至还剩下 将其移入 15 mL 离心管中, 于氮吹仪氮吹挥干, 加入 1 mL 乙腈充分振荡, 混合, 经过 2 ～ 3 mL 提取液时, 0. 45 m 过滤后转入进样瓶直接 HPLC 分析.
3
3. 1
结果与讨论
对位红的色谱行为和检出限的确定 在上述测定条件下, 对位红色谱峰与溶剂峰及干扰峰完全分离 见图 2) ( .对位红的保留时间为
7. 667 ± 0. 04 min. 在建立的色谱条件下, 分别以 0. 02, 05, 1, 2, 5 及 1. 0 mg / L 水平测定 6 个浓度系列, 0. 0. 0. 0. 以各 为自变量, 得线性方程 Y = 69. 19 C i + 0. 213, 相关系数的 药物浓度 Y) ( 为因变量, 以各平均峰面积 C i ) ( 平方 R2 ) 0. 9978; ( 为 可见在 0. 02 ～ 1. 0 mg / L 范围内响应峰面积值与药物浓度呈良好的线性关系.以 信燥比 S / N = 3 计, 本方法对位红的检出限为 0. 02 mg / L, 可定量限 0. 05 g / g.
图2 Fig. 2
对位红标准品 a) ( 以及阴性辣椒酱 b) 辣酱油 c) ( , ( 样品添加回收经 GPC 系统净化后的色谱图 Liquid chromatogram of para red solution a ) and the negative samples fortified with para red (
( b. pimiento catsup;c. chili sauce)by gel permeation chromatography( GPC)
3. 2
方法回收率和精密度
空白样品分别加标配制为 0. 05, 1, 5 及 1. 0 g / g, 0. 0. 按上述方法制样后作 HPLC 测定.将峰面积 乘以样品处理中的稀释倍数, 与相应浓度工作液响应峰面积比较, 计算各加标样品的回收率.各浓度添 加水平在同天内重复处理 4 个样品平行; 在不同天内分别重复处理 3 次进行测定, 计算各浓度响应峰面 C± SD 批内, 积值的 X 批间相对标准偏差; 对位红在辣椒酱和辣酱油中的提取回收率分别是 (71. 0 ± 2. 6) ～ % (90. 44 ± 3. 99 ) 和 % (72. 08 ± 3. 14 ) ,～(91. 84 ± 2. 03 ) , % % 批内和 批 间 相 对 标 准 偏 差 ( RSD) 5% , 均 见表 1 和表 2.
第6 期
殷居易等: 凝胶净化-高效液相色谱法检测对位红在辣椒酱和辣酱油中的残留量
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表 1 辣椒酱加标提取回收率 n = 4 × 3) ( Table 1 The recoveries of in the negative pimiento catsup fortified with para red n = 4 × 3) (

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